
易菇網(wǎng)訊:“不同種質植物之間的微衛(wèi)星DNA片段會產(chǎn)生較為明顯的差異性,可以用于區(qū)分不同種或者同種不同個體;多態(tài)性高,特異性強,區(qū)分度好,開發(fā)難度大;目前DNA指紋鑒定圖譜技術已經(jīng)廣泛的應用于中藥鑒定領域。”11月24日下午,在2018第六屆全國天麻會議“天麻‘兩菌一種’發(fā)展高峰論壇”環(huán)節(jié),陜西理工大學周天華博士在報告中講到。他向與會代表分享了天麻種質資源的DNA指紋圖譜研究。

天麻為蘭科天麻屬植物,依據(jù)天麻花序軸顏色不同可分為5個變型:紅天麻、綠天麻、烏天麻、黃天麻與松天麻。“不同天麻的變型天麻素差異顯著,主要藥用活性成分為天麻素(對-羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖),不同種質間天麻素含量差異較大;不同變型間的天麻塊莖在形態(tài)上幾乎沒有差異,難以從形態(tài)學上準確區(qū)分,給種質資源鑒定、良種選育、加工和臨床用藥等帶來很大的困難;亟需利用DNA分子鑒定的方法,為該藥材良種選用及用藥安全提供重要技術支撐。”會上,周天華分表示。
談及DNA指紋圖譜與分子鑒定技術問題,周天華表示:“不同個體都具有獨一無二的DNA組成;DNA指紋圖譜技術是通過研究不同個體的特定DNA片段,用于個體識別,鑒定親緣關系,遺傳育種等;常見的DNA指紋圖譜(分子標記)RAPD, RFLP, AFLP, ISSR, SSR, SNP。微衛(wèi)星DNA(Microsatellite DNA)也稱為簡單重復序列(simple sequence repeats, SSRs),是由1~6bp的重復單元串聯(lián)而成一段DNA,并且廣泛的分布于核基因組與葉綠體基因中;不同種質植物之間的微衛(wèi)星DNA片段會產(chǎn)生較為明顯的差異性,可以用于區(qū)分不同種或者同種不同個體;其多態(tài)性高,特異性強,區(qū)分度好,開發(fā)難度大;目前DNA指紋鑒定圖譜技術已經(jīng)廣泛的應用于中藥鑒定領域。”他還強調,本研究旨在開發(fā)天麻微衛(wèi)星分子標記,為天麻的良種選育與用藥安全提供技術支撐。
會上,周天華還介紹了研究思路與方法。他講到,在陜西、湖北、云南、貴州四個產(chǎn)地采集天麻烏、紅、綠3種變型,共計12個種群,120個個體;通過二代測序技術,建立基因組文庫,篩選微衛(wèi)星片段,建立天麻微衛(wèi)星文庫;對天麻的微衛(wèi)星文庫進行特征分析,利用軟件開發(fā)天麻SSR引物60多對,對60多引物對部分樣本的PCR擴增與聚丙烯酰胺凝膠電泳,篩選出具有較高多態(tài)性的引物;最后利用所篩選的引物對120個樣本進行擴增與檢查;統(tǒng)計條帶,建立天麻SSR指紋鑒定圖譜。其中,120個天麻樣本中共檢測出有112種基因型組合;絕大多數(shù)個體有特異基因型,共享基因型的僅發(fā)生在種群內;表明微衛(wèi)星分子標記在個體水平上有較高的鑒定效率。
最后,周天華總結了該研究成果,一是開發(fā)了天麻微衛(wèi)星分子標記1套,共20對,特異性強,多態(tài)性高;二是天麻的遺傳多樣性高與遺傳分化強烈;三是微衛(wèi)星分子標記的鑒定效率高。應用前景包括種質資源鑒定、良種選育、混偽品鑒定、物種保護、標志性特征構建及DNA指紋圖譜構建。
2018第六屆全國天麻會議暨寧強第二屆天麻貿易洽談會由中國菌物學會主辦,中共寧強縣委、寧強縣人民政府、易菇網(wǎng)、中國菌物學會菌物產(chǎn)業(yè)分會、陜西理工大學共同承辦,由陜西省食藥用菌工程技術研究中心、貴州烏蒙騰菌業(yè)有限公司、諸城市良工機械有限公司、陜西漢中思青科技農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司、寧強縣真菌研究所、西鄉(xiāng)縣天麻研究所協(xié)辦,并得到了陜西慶瑞豐食藥用菌科技有限公司、陜西森盛菌業(yè)科技有限公司、西鄉(xiāng)縣食用菌研究所、漢中市永誠塑業(yè)有限公司、岳西縣俊峰機械加工廠、岳西縣岳工機械有限公司、安徽財萱新能源有限公司、安徽綠星節(jié)能科技有限公司、德江縣綠通天麻發(fā)展有限公司、略陽縣榮昌食用菌種植農(nóng)民專業(yè)合作社、安徽省金寨縣宏志天麻專業(yè)合作社的大力支持。本次會議除主旨報告外,還舉行有天麻“兩菌一種”發(fā)展高峰論壇、天麻藥食同源產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、天麻產(chǎn)業(yè)精準扶貧經(jīng)驗交流會、新產(chǎn)品新技術交流會、中國(漢中·寧強)天麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇,以及天麻產(chǎn)業(yè)博覽會,會議同期還舉行了良工機械天麻行業(yè)客戶答謝晚宴,慶瑞豐招商推介會暨客戶聯(lián)誼會以及參觀西鄉(xiāng)縣食用菌研究所等活動。第六屆全國天麻會議在寧強的召開,為我國天麻主產(chǎn)區(qū)產(chǎn)業(yè)升級,助推扶貧起到極大作用,也將成為天麻產(chǎn)業(yè)具有歷史意義的一次盛會。