【作者】劉巍峰;高東;王祖農(nóng);
【機(jī)構(gòu)】山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室!濟(jì)南 250100;
【摘要】把大腸桿菌β-半乳糖苷酶基因克隆到帶有酵母半乳糖可誘導(dǎo)啟動(dòng)子GAL1的穿梭表達(dá)質(zhì)粒pYESZ中,并把得到的重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化到兩種不同遺傳性狀的宿主菌中,其中一株菌為蛋白酶活性缺失90%以上的pep4-3突變菌株。通過比較兩株重組菌產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶活性水平發(fā)現(xiàn)在所述實(shí)驗(yàn)條件下,蛋白酶缺失突變菌株中產(chǎn)生的β-卜半乳糖苷酶活水平不僅均要高于另一對(duì)照菌株,并且pep4-3突變菌株表現(xiàn)出受葡萄糖阻遏的嚴(yán)緊程度高及對(duì)誘導(dǎo)反應(yīng)迅速等特點(diǎn)。此外,帶有重組質(zhì)粒的pep4-3突變菌株在葡萄糖阻遏培養(yǎng)基中最大生長(zhǎng)量和重組對(duì)照菌株基本相同,但β-半乳糖苷酶在pep4-3突變菌株中的表達(dá)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響明顯小于對(duì)照菌株。
【關(guān)鍵詞】釀酒酵母;β-半乳糖苷酶基因;GAL1啟動(dòng)子;誘導(dǎo)表達(dá);
【基金】國(guó)家教委博土點(diǎn)基金;
【分類號(hào)】Q936;