【作者】于勇海 龔雋 余明琨
【機構(gòu)】中國科學技術(shù)大學研究生院生物教學部;
【摘要】雷丸(OmphalialapidescensSchroct.)經(jīng)過Tris-HCl緩沖液浸提,硫酸銨分級沉淀,離子交換,卵粘蛋白-Sepharose4B親和層析以及Sephacryl-S100分子篩等步驟,純化得到純度為95%以上的雷扎凝集素(簡稱OLL)。比活提高45.8倍,活力回收2.5%。雷丸凝集素是單一肽鏈的蛋白質(zhì),分子量為12kDa,等電點為7.5,可被半乳糖抑制。具有熱穩(wěn)定性及酸堿(pH1~12)穩(wěn)定性。2mmol/L氯化鋅可使其比活提高4倍。同兔血相比,與人血進行凝集反應,其比活可提高4倍。進行圓二光譜測定,α-螺旋和β-折疊含量較高。與半乳糖間的抑制反應瞬間內(nèi)完成,且空間結(jié)構(gòu)變得緊密。
【關(guān)鍵詞】凝集素; 雷丸凝集素; 雷丸; 理化性質(zhì);