【作者】郭梅 蒲軍 杜連祥 路福平 白東清

【機(jī)構(gòu)】天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 天津300222天津農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)系天津300384,天津300222,天津300222,天津300222,天津300222天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)系天津300384

【摘要】以白腐菌雜色云芝Coriolus versicolor RNA為模板,通過RT-PCR獲得漆酶Leel基因的cDNA片段。構(gòu)建了甲醇酵母表達(dá)質(zhì)粒pmeta-Lccl載體,并將其線性化后用電穿孔法導(dǎo)入Pichia methabolica PMAD16,部分陽性克隆的PCR結(jié)果表明Lccl基因已經(jīng)整合到甲醇畢赤酵母染色體上,經(jīng)搖瓶培養(yǎng)篩選出表達(dá)水平較高的酵母工程菌株。漆酶酶活力達(dá)53U/L 

【關(guān)鍵詞】cDNA; 載體的構(gòu)建; 異源表達(dá);

重組質(zhì)粒pmeta一Lccl的酶切鑒定

異源表達(dá);重組酵母基因組DNA