【作者】伏建國(guó) 強(qiáng)勝 朱云枝

【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)雜草研究室 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)雜草研究室 南京210095

【摘要】以鏈格孢菌Alternariaalternata菌株NEW為供試菌株,研究了菌齡、酶系統(tǒng)、酶解時(shí)間、酶解溫度及穩(wěn)滲劑對(duì)鏈格孢菌原生質(zhì)體制備的影響。結(jié)果表明,制備鏈格孢菌原生質(zhì)體比較適宜的條件為PD液體培養(yǎng)基培養(yǎng)20h,以0.7mol/LNaCl為穩(wěn)滲劑、1%LysingEnzyme、1%Drislase和1%Snailase3種酶溶液混合使用,30℃酶解3h。對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行了限制性內(nèi)切酶介導(dǎo)整合(REMI)轉(zhuǎn)化,篩選到了鏈格孢菌弱致病突變株NEW001,為致病相關(guān)基因的標(biāo)記和克隆打下了基礎(chǔ)。 

【基金】國(guó)家863項(xiàng)目(2001AA246012)； 國(guó)家自然科學(xué)基金(30170619)資助；

【關(guān)鍵詞】制備原生質(zhì)體適宜條件; 致病性變異; 弱致病突變株;