【作者】郭麗瓊 王秀旭 柳永 舒薇 林俊芳

【機構】華南農(nóng)業(yè)大學食品學院生物工程系華南農(nóng)業(yè)大學測試中心華南農(nóng)業(yè)大學食品學院生物工程系 華南農(nóng)業(yè)大學生物質能研究所廣州 510640

【摘要】利用從香菇菌絲體中克隆的啟動子片段gpd-Le(613bp)和ras-Le(715bp)分別連接于報告基因gfp(綠色熒光蛋白基因)的上游,構建了啟動子功能活性檢測表達質粒pLg-gfp和pLr-gfp。采用PEG介導法把表達質粒pLg-gfp和pLr-gfp分別與輔助質粒pCc1001(含有trp1基因)共轉化進色氨酸營養(yǎng)缺陷型的灰蓋鬼傘粉孢子的原生質體中。經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選、假定轉化子的分子鑒定以及GFP熒光檢測。結果表明:香菇gpd-Le啟動子在灰蓋鬼傘的菌絲中具有較強驅動外源gfp基因表達的活性,在熒光顯微鏡和共聚焦顯微鏡下觀察到gfp基因表達的綠色熒光。而香菇ras-Le啟動子沒有檢測到有驅動外源gfp基因表達的活性。 

【基金】國家自然科學基金(No．30371000,39960050,30060054)； 廣東省科技攻關(No．2004820101001)； 廣東省自然科學基金(No．5006680,032239)；

【關鍵詞】香菇; 啟動子活性; 灰蓋鬼傘; 共轉化; gfp基因;