【作者】張洪 丁可 裴國亮 郭軍 康振生
【機構(gòu)】西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護學(xué)院陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點實驗室
摘要:胞質(zhì)游離鈣離子變化與植物病原真菌侵染寄主的動態(tài)過程具有重要的關(guān)聯(lián)性。本研究以侵染小麥葉片的條銹菌31號生理小種(CYR31)為材料,以孵育法將Ca2+熒光探針Fluo-3-AM載入到小麥條銹菌細(xì)胞中,并結(jié)合激光共聚焦掃描顯微技術(shù),建立了測定侵染過程中條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+分布的試驗方法。結(jié)果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM裝載順次進(jìn)行低溫4℃孵育1h,25℃孵育1h,可獲得較為理想的條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+染色結(jié)果。該方法可用于檢測不同侵染階段的小麥條銹菌細(xì)胞質(zhì)游離鈣離子的分布變化,為進(jìn)一步研究銹菌胞內(nèi)鈣離子動態(tài)與侵染寄主的關(guān)聯(lián)性提供了技術(shù)支撐。
基金:國家自然科學(xué)基金(No.30671350); 教育部科學(xué)技術(shù)研究重點項目(No.107104); 教育部長江學(xué)者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃項目(No.IRT0558); 高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計劃資助項目(No.B07049);
關(guān)鍵詞:熒光指示劑; 孵育條件; 最適溫度;
【機構(gòu)】西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護學(xué)院陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點實驗室
摘要:胞質(zhì)游離鈣離子變化與植物病原真菌侵染寄主的動態(tài)過程具有重要的關(guān)聯(lián)性。本研究以侵染小麥葉片的條銹菌31號生理小種(CYR31)為材料,以孵育法將Ca2+熒光探針Fluo-3-AM載入到小麥條銹菌細(xì)胞中,并結(jié)合激光共聚焦掃描顯微技術(shù),建立了測定侵染過程中條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+分布的試驗方法。結(jié)果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM裝載順次進(jìn)行低溫4℃孵育1h,25℃孵育1h,可獲得較為理想的條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+染色結(jié)果。該方法可用于檢測不同侵染階段的小麥條銹菌細(xì)胞質(zhì)游離鈣離子的分布變化,為進(jìn)一步研究銹菌胞內(nèi)鈣離子動態(tài)與侵染寄主的關(guān)聯(lián)性提供了技術(shù)支撐。
基金:國家自然科學(xué)基金(No.30671350); 教育部科學(xué)技術(shù)研究重點項目(No.107104); 教育部長江學(xué)者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃項目(No.IRT0558); 高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計劃資助項目(No.B07049);
關(guān)鍵詞:熒光指示劑; 孵育條件; 最適溫度;