【作者】鐘志敏 賴小平 黃松 張桂芳

【機構】廣州中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥數(shù)理工程研究院 廣東省中藥新藥研發(fā)重點實驗室

摘要：本文對石斛內生炭角菌DNA提取方法進行優(yōu)化,并基于ITS序列及其ITS2二級結構對其進行分子鑒定。比較試劑盒法及不同濃度(2%、3%、4%)CTAB法的DNA提取效果并對CTAB法進行優(yōu)化;進行ITS序列的擴增及ITS2二級結構的預測。結果表明:4%的CTAB提取效果最佳,優(yōu)化的CTAB法大大縮短了DNA提取時間;ITS序列與炭角菌屬3個種的相似度均為99%,ITS2二級結構僅與Xylaria arbuscula的二級結構100%相似。本研究所優(yōu)化的CTAB法能為后續(xù)相關研究提供便利;結合ITS序列及ITS2二級結構能對石斛內生炭角菌進行準確的分子鑒定。 

 

基金：港澳臺科技合作專項項目(2014DFH30010)； 廣東省應用型科技研發(fā)專項資金重點項目(2015B020234008)~~；

 

關鍵詞：石斛; 炭角菌; 優(yōu)化CTAB法; 菌種鑒定;